Detektions-Reagenzien
Bevor membrangebundene Antigene detektiert werden können, müssen die
unspezifischen Bindungsstellen für Antikörper auf der Transfermembran
blockiert werden. Für viele Applikationen ist Magermilchpulver
eine preiswerte Alternative zu Rinderserumalbumin (BSA). Für Western
Blots, für die das Magermilchpulver nicht geeignet ist, bietet SERVA eine
Auswahl hochreiner Rinderserumalbumine.
Protein-enthaltende
Blockierungs-Lösungen, wie Magermilchpulver oder BSA-Lösungen, blockieren
nicht nur unspezifische Antikörper-Bindungsstellen, sondern können auch
spezifische Bindungsstellen maskieren.
BlueBlock PF, ein
Protein-freies, Polymer-basiertes Blockierungs-Reagenz ermöglicht die
Blockierung unspezifischer Bindungen in nur 5 min ohne Sensitivitätsverlust in
kolorimetrischen, Chemilumineszenz- und Fluoreszenz-Detektionssystemen. Das
All-In-One-Protokoll, die Antikörperinkubation in der Blockierlösung, erlaubt
die Durchführung in nur 1 - 2 Std.
Nach dem Blotten von
Nukleinsäuren werden vor der Hybridisierung unspezifische
Bindungsstellen mit Denhardts-Lösung (Kat.-Nr. 39603) blockiert.
Neben
einem breiten Angebot an Substraten in Pulverform, bietet SERVA
gebrauchsfertige, hochsensitive Substratlösungen für die einfache und rasche
Detektion von Proteinen in Western Blots an.
SERVALight HRP
Chemilumineszenz-Kits sind hochsensitive Substrate für den Nachweis
membrangebundener Antigene (Western Blot) oder Nukleinsäuresequenzen (Southern
und Northern Blot), die entweder direkt mit Meerettich-Peroxidase (HRP) oder
indirekt mit HRP-konjugierten Antikörpern/Streptavidin markiert sind. Sie
haben eine ausgezeichnete Stabilität, eine verlängerte Signaldauer und sparen
Kosten, da die Antikörper in hohen Verdünnungen eingesetzt werden können.
SERVAColor
BCIP/NBT und TMB Blot-Lösung sind nicht-toxische, hochsensitive
Substratlösungen für den kolorimetrischen Nachweis von alkalischer Phosphatase
(AP) bzw. Meerrettich-Peroxidase (HRP) in Membran-Assays.
Das Testen von neuen primären Antikörpern bzw. optimalen Antikörperkonzentrationen benötigt die Durchführung mehrerer Western Blots. Dies ist nicht nur teuer, es werden auch seltene bzw. teure Proben verschwendet. Durch das Entfernen der Antikörper („Stripping“) nach der Chemilumineszenz-Detektion und die Wiederverwendung („Re-Probing“) kann der Einsatz mehrerer Gele zur Untersuchung verschiedener Zielstrukturen vermieden werden. BlueClear SB ist ein gebrauchsfertiger Puffer für das effiziente Strippen hochaffiner Antikörper von Western Blot-Membranen. Der BlueClear SB Stripping Puffer entfernt ohne Verlust oder Beschädigung des immobilisierten Antigens primäre und sekundäre Antikörper sauber und effizient von Western Blots, was die zuverlässige Rehybridisierung der Blots ermögicht.