Dialyse
Dialyse ist ein Prozess, bei dem Substanzen in Lösung durch Unterschiede in ihrem Molekulargewicht getrennt werden. Die Dialysiermembranen sind semipermeabel, aus regenerierter Cellulose oder Celluloseester hergestellt und haben eine Gel-ähnliche Struktur. Die treibende Kraft ist die Konzentrationsdifferenz zwischen zwei Lösungen auf gegenüber liegenden Seiten der Membran. Da die poröse Membran selektiv kleinere gelöste Stoffe passieren lässt, während größere Substanzen zurückgehalten werden, lässt sich die Dialyse effektiv als Trennprozess basierend auf Größenrejektion einsetzen.
Da die Dialysiermembran aus einer schwammartigen Matrix quervernetzter Polymere besteht, ist die als Molekulargewichts-Ausschlussgrenze bezeichnete Porenbemessung ein indirektes Maß für die Retentionsleistung der Membran.
Der Membran-MWCO gibt die Größe des gelösten Stoffes an, die zu mindestens 90 % zurück gehalten wird. Die Durchlässigkeit für einen gelösten Stoff hängt jedoch auch von der Molekülform, dem Grad der Hydratisierung, der Ionenstärke und der Polarität ab. Deshalb empfiehlt es sich einen MWCO auszuwählen, der der halben Größe des Molekulargewichtes der Substanz entspricht, die zurückgehalten werden soll und/oder der doppelten Größe des Molekulargewichtes der Substanzen, die die Membran passieren sollen.
Seit vielen Jahren wird die Dialyse als Routinemethode zum Entsalzen und Konzentrieren von Lösungen komplexer Biomoleküle eingesetzt. Ferner können Makromoleküle, die sich wesentlich in ihren Molekulargewichten unterscheiden, getrennt werden
.
Applikationen
- Entsalzen von Proteinlösungen, für weitere Reinigung z.B. durch Ionenaustauscher-Chromatographie
- Konzentration von Proteinlösungen, indem die gefüllten Dialysierschläuche in trockenes PEG 20 000 (Kat.-Nr. 33138) eingebettet werden, z.B. vor weiterer Reinigung durch Gelfiltrationschromatographie
- Trennung von hochmolekularen Proteinen von Peptiden und anderen Substanzen mit niedrigem Molekulargewicht
- Pufferaustausch mit Lösungen von Proteinen oder anderen Makromolekülen
- Entsalzen von Metallkolloiden