Protein-Standards für die IEF
Aufgrund des hohen Auflösungsvermögens bei gleichzeitiger Erhaltung des nativen Zustandes wird die IEF vorzugsweise für die Charakterisierung komplexer Proteinmischungen eingesetzt, insbesondere, wenn die Komponenten nahezu ununterscheidbar sind, wie z.B. die Isoformen bestimmter Enzyme. Die Verwendung ultradünner Flachbett-Gele (0,5 mm oder dünner) ermöglicht in diesen Fällen eine extrem hohe Auflösung.
Für die Routineanalyse erhältliche Fertiggele mit Trägerampholyten oder immobilisierten pH-Gradienten sparen Zeit und Mühe und ermöglichen reproduzierbare, zuverlässige Ergebnisse.
Um den isoelektrischen Punkt unbekannter Proteine zu bestimmen, kann der pH der fokussierten Banden auf der Geloberfläche mittels einer Oberflächen-pH-Elektrode gemessen werden. Weit verbreitet ist die pI-Bestimmung durch Ko-Elektrophorese mit Proteinen mit bekannten isoelektrischen Punkten. Durch einfaches Vergleichen der Position der unbekannten Proteinbande mit der des bekannten Markerproteins kann der pI-Wert recht genau interpoliert werden.
Vorteile:
- Gebrauchsfertiger Proteinmarker für die IEF
- Ein Standard, der auf allen IEF-Geltypen verwendet werden kann (vertikal/horizontal)
- Gereinigte Proteinkomponenten, salzfrei
- 13 Isoformen mit charakteristischem Bandenmuster
- Für die Bestimmung des pI unbekannter Proteinproben
- Für die Kontrolle der Trennqualität des IEF-Gels