Super Nickel NTA-Affinitätsharz zur Aufreinigung von Poly-His-Tag-Proteinen. Nickelionen wurden sorgfältig auf eine 7,5 % quervernetzte Agarose-Matrix via eines NTA-gekoppelten Liganden geladen. Ergebnis ist eine stabile Affinitätsmatrix mit der höchsten Bindungsaffinität zu Histidin-Resten mit bis zu 70 mg/ml (bestimmt mit geklärtem E. coli-Lysat). Andere Metallionen wie Co²⁺, Zn²⁺, Fe³⁺ und Al³⁺ können ebenfalls eingesetzt werden und haben eigene, zu den anderen Ionen jeweils unterschiedliche Affinitäten. Bei Bedarf kann das Nickelion durch 5 Waschschritte mit 100 mM EDTA von der Matrix entfernt und mit unterschiedlichen Metallionen wieder beladen werden.
Spezifikationen
Spezifität: Poly-His-Tag
Matrix: 7,5 % quervernetzte Agarose
Ligand: NTA
Bindungskapazität: 70 mg/ml
Körnung: 32 - 60 µm, im Schnitt 40 µm
Flussrate: 0,25 – 1 ml/min (Optimum); 6 ml/min (Maximum)
Maximaler Druck: 72 psi
Puffer-Kompatibilität: Übliche wässrige Puffer von pH 2 bis 14
Reinigungs-Puffer - Beispiele: 100 % Methanol. 100% Ethanol, 8 M Harnstoff, 6 M Guanidiniumhydrochlorid, 30 % (v/v) Acetonitril
Lagerung: In Äquilibrierungspuffer bei 2 – 8 °C (Kurzzeitlagerung), in 20 % Ethanol bei 2 – 8 °C (Langzeitlagerung)